人源的单克隆IgG1抗体Adalimumab阿达木单抗

　　Adalimumab是一种人源的单克隆IgG1抗体，靶向肿瘤坏死因子α(TNF-α)。

 

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　　Adalimumab阿达木单抗的生物活性

 

　　体外研究

 

　　使用Adalimumab处理HUVEC长达12小时，显示对其细胞活力没有不利影响，即使Adalimumab的浓度比本研究中使用的浓度高10倍。

 

　　体内研究

 

　　Adalimumab的消除半衰期很长(t1/2=~20天)。

 

　　荧光标记的Adalimumab富集主要在油红O阳性病变中观察到，证明药物进入动脉粥样硬化斑块的良好组织渗透性，在溶剂对照注射到高胆固醇血症Ldlr-/-老鼠后，血管壁无背景荧光。

 

　　Adalimumab阿达木单抗的实验参考方法

 

　　细胞实验

 

　　在EGM中，每个96孔板的孔内都种植了1×104 HUVECs。当细胞达到亚汇聚状态后，它们被培养在不同浓度的阿达木单抗（0.01-10μg/mL）、IgG同型对照（10μg/mL）和0.1%Triton-X作为阳性对照下，在5%CO2、37°C的条件下培养。12小时后，每个孔中加入10%Alamar蓝，并置于培养箱中再培养6小时。使用Infinite M200 pro板读取器在600 nm处测量氧化Alamar蓝的吸光度。所有测量均以三重复进行。

 

　　动物给药

 

　　小鼠

 

　　为了分析阿达木单抗在血管中的分布，使用DyLight 549 Microscale Antibody Labeling Kit标记该物质。简而言之，将一小瓶DyLight 549试剂溶解在1 mg的阿达木单抗溶液（PBS中）中，并用树脂旋转柱去除过量的荧光剂。连续两天给高胆固醇血症的Ldlr-/-小鼠注射荧光素标记的阿达木单抗（8.0 mg/kg，PBS 200μL i.p.）并在最后一次注射12小时后处死。用PBS（200μL）作为对照进行注射。

 

　　MCE并未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。