Nocodazole
2019-03-14 
MCE小分子
Nocodazole是快速可逆的 microtubule 抑制剂。 Nocodazole与β-微管蛋白结合并破坏微管组装/拆卸动力学，从而防止有丝分裂并诱导肿瘤细胞凋亡。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Nocodazole的生物活性
体外
Nocodazole对c-KIT表现出良好的亲和力，在高度恶性的人癌细胞中Kd值为1.6μM。 诺考达唑对促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径的组分显示出良好的结合亲和力，例如BRAF（Kd =1.8μM），BRAF（V600E）（Kd =1.1μM），MEK1（Kd =1.7μM），和 MEK2（Kd =1.6μM）。 Nocodazole对αβIV的亲和力最高，对αβIII的亲和力最低。 从nocodazole阻滞释放后，有丝分裂同步的细胞对非常低浓度的紫杉醇敏感，持续<30分钟，即纺锤体形成所需的时间，但对长春碱保持敏感> 90分钟。 Nocodazole（1 nM）诱导COLO 205癌细胞凋亡。 Nocodazole（≥30μg/ mL）显着增加膜联蛋白-V结合细胞的百分比，而不显着改变人红细胞的平均前向散射。
体内
Nocodazole（5mg / kg /每周三次，腹膜内注射）在携带COLO 205肿瘤异种移植物的无胸腺小鼠中具有抗肿瘤作用。 Nocodazole（1 nM）+酮康唑显着增加肿瘤组织中p21 / CIP1和p27 / KIP1蛋白的水平
Nocodazole的实验参考方法
细胞分析
蛋白质以50μg/泳道加载，并用12％（w：v）十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，印迹，并用抗体对细胞周期蛋白E，p53，p21 / CIP1，p27 / KIP1，甘油醛-3-磷酸进行探测。 脱氢酶（GAPDH），细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白D1，细胞周期蛋白D3，细胞周期蛋白B，CDK2，CDK4和细胞色素C.免疫反应条带通过与发色底物氮蓝四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚 - 一起孵育而可视化。 磷酸盐。 GAPDH的表达用作相等蛋白质加载的对照。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
COLO 205细胞在补充有10％FCS的RPMI 1640中生长。 通过连续两次胰蛋白酶消化收获细胞，以300×g离心; 保持5分钟，洗涤两次，并重悬于无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。 将0.1mL的细胞（5×105）皮下注射到每只裸鼠的肩胛骨之间。 移植后，用卡尺测量肿瘤大小，估计肿瘤体积。 一旦肿瘤达到平均大小200 mm3，动物每周三次腹膜内注射DMSO（25μL），酮康唑（50 mg / kg），诺考达唑（5 mg / kg）或酮康唑+诺考达唑，持续6周。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
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Nocodazole的生物活性
体外
Nocodazole对c-KIT表现出良好的亲和力，在高度恶性的人癌细胞中Kd值为1.6μM。 诺考达唑对促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径的组分显示出良好的结合亲和力，例如BRAF（Kd =1.8μM），BRAF（V600E）（Kd =1.1μM），MEK1（Kd =1.7μM），和 MEK2（Kd =1.6μM）。 Nocodazole对αβIV的亲和力最高，对αβIII的亲和力最低。 从nocodazole阻滞释放后，有丝分裂同步的细胞对非常低浓度的紫杉醇敏感，持续<30分钟，即纺锤体形成所需的时间，但对长春碱保持敏感> 90分钟。 Nocodazole（1 nM）诱导COLO 205癌细胞凋亡。 Nocodazole（≥30μg/ mL）显着增加膜联蛋白-V结合细胞的百分比，而不显着改变人红细胞的平均前向散射。
体内
Nocodazole（5mg / kg /每周三次，腹膜内注射）在携带COLO 205肿瘤异种移植物的无胸腺小鼠中具有抗肿瘤作用。 Nocodazole（1 nM）+酮康唑显着增加肿瘤组织中p21 / CIP1和p27 / KIP1蛋白的水平
Nocodazole的实验参考方法
细胞分析
蛋白质以50μg/泳道加载，并用12％（w：v）十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，印迹，并用抗体对细胞周期蛋白E，p53，p21 / CIP1，p27 / KIP1，甘油醛-3-磷酸进行探测。 脱氢酶（GAPDH），细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白D1，细胞周期蛋白D3，细胞周期蛋白B，CDK2，CDK4和细胞色素C.免疫反应条带通过与发色底物氮蓝四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚 - 一起孵育而可视化。 磷酸盐。 GAPDH的表达用作相等蛋白质加载的对照。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
COLO 205细胞在补充有10％FCS的RPMI 1640中生长。 通过连续两次胰蛋白酶消化收获细胞，以300×g离心; 保持5分钟，洗涤两次，并重悬于无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。 将0.1mL的细胞（5×105）皮下注射到每只裸鼠的肩胛骨之间。 移植后，用卡尺测量肿瘤大小，估计肿瘤体积。 一旦肿瘤达到平均大小200 mm3，动物每周三次腹膜内注射DMSO（25μL），酮康唑（50 mg / kg），诺考达唑（5 mg / kg）或酮康唑+诺考达唑，持续6周。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
