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Pilocarpine

    Pilocarpine Hydrochloride 是一种选择性的 M3 型毒蕈碱乙酰胆碱受体 (M3 muscarinic receptor) 激动剂。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    为了评估毛果芸香碱的细胞毒性,分别通过光学显微镜和MTT法检查了人角膜基质(HCS)细胞的形态和活力。形态学观察表明,暴露于浓度为0.625至20 g / L毛果芸香碱的HCS细胞表现出剂量和时间依赖性的增殖迟缓和形态异常,例如细胞萎缩,胞质空泡,从培养基质中脱离,最终死亡,而没有浓度低于0.625 g / L的毛果芸香碱暴露者与对照组之间存在明显差异。MTT分析结果表明,暴露于浓度大于0.625 g / L的毛果芸香碱后,HCS细胞的细胞活力随时间和浓度而降低(P <0.01或0.05)。部分毒蕈碱激动剂毛果芸香碱在大鼠尾动脉的分离部分中引起浓度依赖性的舒张,EC 50为2.4 mM,被苯肾上腺素(10至200 nM)收缩 。
 
    体内
 
    检查了毛果芸香碱诱导的对照大鼠(CN)和运动大鼠(EX)的唾液分泌。EX大鼠中毛果芸香碱诱导的唾液量显着高于CN大鼠(P <0.01)。相反,EX大鼠唾液中的Na +浓度显着低于CN大鼠(P <0.05)。
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    细胞存活力通过MTT测定法确定。简而言之,将HCS细胞以1×10 4细胞/100μL/孔的密度接种到96孔培养板(Nunc)中,并进行培养和处理。每隔4小时,将含毛果芸香碱(0.625至20 g / L)的培养基完全替换为100μL含1.0 g / L MTT的无血清DMEM / F12培养基,并将细胞在黑暗中于37°C孵育4小时。小心丢弃含MTT的培养基后,添加150 ?L DMSO在37°C下在黑暗中溶解所产生的甲maz晶体15分钟,并用Multiskan GO酶标仪测量490 nm的吸光度
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    Animal Administration
 
    大鼠
 
    将10周大的雄性Wistar大鼠分为两组(运动组(EX,n = 6)和对照组(CN,n = 6))之一。将EX大鼠放在带有滚轮(SN-451)的笼子中40天,使其可以进行自愿锻炼,而将CN大鼠放在锁有滚轮的笼子中。在第40天,如下测定毛果芸香碱诱导的唾液。简而言之,将大鼠麻醉,将预先称重的棉花舌下放入嘴中,并腹膜内注射毛果芸香碱(0.5 mg / kg)以诱导唾液分泌。然后每10分钟更换每个棉球1小时。再次称重收集的棉球,并通过从最终重量中减去初始重量来计算分泌的唾液质量。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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