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Ferrostatin-1抑制剂

    Ferrostatin-1 是 ferroptosis 的强效抑制剂,其 EC50 值为 60 nM。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    Ferrostatin-1是HT-1080细胞中最有效的erastin诱导的铁蛋白沉积抑制剂(EC 50 = 60 nM)。Ferrostatin-1不抑制ERK磷酸化或阻止HT-1080细胞的增殖。然而,Ferrostatin-1可以防止erastin诱导的细胞溶质和脂质ROS的积累[1]。用0.4μMFerostostatin-1预处理的细胞显着降低细胞内活性氧(ROS)和氮物种(RNS)低于基础水平。另外,通过0.4μM的Ferrostatin-1预处理,细胞内ROS水平的增加也显着降低至基础水平以下。与载体(0.02%DMS??O)处理的细胞相比,Ferrostatin-1处理24小时不会改变SHSY-5Y细胞中i-NOS的表达水平。
 
    实验参考方法
 
    激酶检测
 
    用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤用Ferrostatin-1处理24小时的细胞三次,并通过离心沉淀。除去上清液,向细胞中加入80μL裂解缓冲液,然后在-20℃下储存过夜。随后,将细胞以10,000RPM离心12分钟,并将沉淀和上清液储存以备将来使用。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    细胞分析
 
    将SH-S5Y细胞接种在24孔板中。孵育过夜后,在标准生长条件下将细胞暴露于1μM的Ferrostatin-1中24小时。使用在活细胞模式中配备10×物镜的倒置显微镜捕获明视野显微照片。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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