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Etoposide

  Etoposide是用于治疗多种癌症的化疗药物。 Etoposide通过与拓扑异构酶II和DNA形成复合物来抑制DNA合成。

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  生物活性

  体外

  依托泊苷通过在RIN-m5F细胞中通过JNK / ERK介导的GSK-3下游触发的线粒体依赖性信号传导途径诱导细胞凋亡,从而对胰腺β细胞产生细胞毒性。依托泊苷和贝伐单抗显着消除了P1球形成能力,这是一种与该细胞亚群凋亡相关的作用。

  体内

  静脉注射到免疫缺陷小鼠中的依托泊苷(50μM)和贝伐单抗治疗的缺氧细胞显示诱导肺集落的能力降低,这也显示具有更长的潜伏期。 使用异环磷酰胺和卡铂的依托泊苷(10 mg / kg /天,i.v。)可降低注射肝母细胞瘤细胞的NMRI裸鼠的肿瘤体积

  Etoposide的实验参考方法

  Etoposide的激酶测定

  在不存在或存在Z-DEVD-FMK(20μM)的情况下,接种RIN-m5F细胞并用依托泊苷(10-50μM)处理。 在处理结束时(24小时),将细胞裂解物在37℃下与10μMAc-DEVD-AMC(半胱天冬酶-3 / CPP32底物)一起温育1小时。 通过分光荧光计测量裂解的基板的荧光,激发波长为380nm,发射波长为460nm。 使用具有570nm吸收带的二辛可宁酸蛋白质测定试剂盒测定细胞裂解物样品的蛋白质水平,以使对照和依托泊苷处理组之间的细胞数标准化。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

  Etoposide的细胞分析

  RIN-m5F细胞是大鼠胰腺β-细胞系,在37℃下在含有5%CO 2 -95%空气混合物的加湿室中培养,并保持在补充有10%胎牛血清(FBS)的RPIM 1640培养基中。 抗生素(100 U / mL青霉素和100μg/ mL链霉素)。 将RIN-m5F细胞接种(2×10 4个细胞/孔)于96孔板中,使其粘附并回收过夜。 将细胞更换为新鲜培养基,然后在不存在或存在药理学抑制剂(氯化锂(LiCl)-50μM;SP600125-20μM;PD98059-20μM)的情况下与依托泊苷(1-100μM)孵育24小时 。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考

  Animal Administration

  建立了裸鼠HB(NMHB)的体内模型。 只有具有胚胎成分的HB细胞才能在该模型中成功移植和再生。 随后将每个NMHB移植到50只小鼠中用于治疗组。 当大多数肿瘤达到50-100mm 3的体积时开始治疗。 根据肿瘤体积对小鼠进行分层,随机分配给每组10只动物。 注射肿瘤的动物在两个区块中给予异环磷酰胺,顺铂,多柔比星,依托泊苷(10mg / kg /天,静脉内)和卡铂作为单一药剂。 每组原始异种移植物的一组10只动物作为对照组。 在开始治疗后,以5天的间隔记录肿瘤生长25-30天,并计算相对肿瘤体积。 在处死动物前24小时,腹膜内注射溴脱氧尿苷(BrdU)用于半定量测定肿瘤细胞的增殖活性(50μgBrdU/ g体重)。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考

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