您的位置:MCE > 抑制剂 >

LY294002抑制剂-pi3k

  LY294002 是一种广谱 PI3K 抑制剂,抑制 PI3Kα, PI3Kδ 和 PI3Kβ的 IC50 分别为 0.5, 0.57, 0.97 μM。 它也可抑制 CK2的活性,IC50 为 98 nM。

  MCE 的所有产品仅用作科学研究,我们不为任何个人用途提供产品和服务

  LY294002的生物活性

  体外

  LY294002(5μM)完全抑制HepG2细胞中PKB的磷酸化。 LY294002(5μM)也显示阻断胰岛素诱导的CHO-IR细胞中PKB Ser473的磷酸化[1]。 LY294002也是CK2(酪蛋白激酶2)的有效抑制剂,IC50为98 nM。 LY294002还能够降低丝氨酸/苏氨酸激酶GSK3α和β的两种同种型的激酶活性[2]。 当CNE-2Z细胞系在含有LY294002(0μM,10μM,25μM,50μM和75μM)的培养基中培养24小时和48小时时,细胞增殖以剂量依赖性方式显着降低[3] ]。

  体内

  与对照组相比,用LY294002(腹膜内注射,50mg / kg,75mg / kg)治疗显着降低了平均NPC肿瘤负荷。 用10mg / kg或25mg / kg LY294002治疗在降低肿瘤负荷方面不太有效。 用LY294002治疗的平均NPC肿瘤负荷以剂量依赖性方式显着降低,而对照组和治疗组之间的平均体重没有明显差异(LY294002,10mg / kg,25mg / kg,50mg / kg和75)。 毫克/公斤)

  LY294002的实验参考方法

  激酶测定[2]

  PI828和LY294002的PI3K抑制在放射测定法中使用具有1μMATP的纯化的重组酶(IA类和IB类)测定。 激酶反应在室温(24℃)下进行1小时,并通过加入PBS终止。 随后使用S形剂量 - 响应曲线拟合(可变斜率)确定IC 50值。 通过激酶选择性筛选确定CK2和GSK3β(糖原合成酶激酶3β)抑制。 在10μMATP中对抗Upstate激酶组测试抑制剂(10μM; PI828和LY294002)[2]。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

  细胞分析[3]

  将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z以5000个细胞/孔接种到96孔板中。 接种细胞后24小时,除去培养基并在溶解于DMSO或DMSO中的LY294002(0μM,10μM,25μM,50μM和75μM)存在下更换另外24小时和48小时。 H。 为了避免DMSO对细胞生长的任何非特异性毒性作用,在所有实验中DMSO浓度维持在0.5%。 向每个孔中加入MTT染料(5mg / mL)。 通过加入DMSO终止反应,并在多孔板读数器上在490nm处测量光密度。 减去不存在细胞时培养基的背景吸光度。 所有样品一式三份进行测定,并计算每个实验的平均值。 结果表示为对照的百分比,其被认为是100%[3]。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

  Animal Administration

  小鼠[3]

  当它们是6-8周时使用无胸腺裸鼠。 将小鼠随机分成5个免费分成组(n = 4只小鼠)。 将小鼠置于相同的环境中,控制温度,湿度和12小时光照/黑暗循环。 将小鼠皮下接种CNE-2Z细胞(在200μLRPMI-1640中1×10 6个细胞/小鼠)到侧腹。 肿瘤摄取率为100%。 1周后,对不同剂量的LY294002(10mg / kg,25mg / kg,50mg / kg和75mg / kg,每周两次(n = 4只小鼠))的异种移植小鼠进行腹膜内注射,每组 监测处理过的小鼠的任何体征。每周测量两次体重和肿瘤大小。用卡尺测量肿瘤大小,计算肿瘤体积(体积=长轴×短轴2)。治疗结束时, 对所有小鼠实施安乐死。将一部分肿瘤组织固定在福尔马林中并包埋在石蜡中,另一部分在-70℃下保存。

  大鼠[4]

  通过腹膜内注射戊巴比妥钠(50mg / kg)麻醉重220-240g的雄性Sprague-Dawley大鼠。 将动物分成3组:NMDA +载体(DMSO)(n = 46),NMDA + LY294002(50nmol)(n = 25)和NMDA +渥曼青霉素(50nmol)(n = 23)。 将总体积为5μL的LY294002或与200nmol NMDA混合的渥曼青霉素注射到一只眼睛的玻璃体腔中。 将相同体积的DMSO注射到对侧眼的玻璃体腔中,其用作对照。 使用32号针在显微镜下进行注射,所述针连接到微量注射器。 将针插入角膜缘后约1mm处。 在注射后第2天和第7天评估视网膜中神经元和血管的损伤。 还研究了单独使用LY294002或Wortmannin的玻璃体内治疗对视网膜神经元和血管的影响。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

点击查看原文:LY294002抑制剂-pi3k


推荐类似文章

抑制剂
上一篇:AZD3759说明书
下一篇:DCFH-DA