LY294002抑制剂-pi3k
2024-01-04 
MCE小分子
LY294002 是一种广谱 PI3K 抑制剂，抑制 PI3Kα, PI3Kδ 和 PI3Kβ的 IC50 分别为 0.5, 0.57, 0.97 μM。 它也可抑制 CK2的活性，IC50 为 98 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
LY294002的生物活性
体外
LY294002（5μM）完全抑制HepG2细胞中PKB的磷酸化。 LY294002（5μM）也显示阻断胰岛素诱导的CHO-IR细胞中PKB Ser473的磷酸化。 LY294002也是CK2（酪蛋白激酶2）的有效抑制剂，IC50为98 nM。 LY294002还能够降低丝氨酸/苏氨酸激酶GSK3α和β的两种同种型的激酶活性。 当CNE-2Z细胞系在含有LY294002（0μM，10μM，25μM，50μM和75μM）的培养基中培养24小时和48小时时，细胞增殖以剂量依赖性方式显着降低 ]。
体内
与对照组相比，用LY294002（腹膜内注射，50mg / kg，75mg / kg）治疗显着降低了平均NPC肿瘤负荷。 用10mg / kg或25mg / kg LY294002治疗在降低肿瘤负荷方面不太有效。 用LY294002治疗的平均NPC肿瘤负荷以剂量依赖性方式显着降低，而对照组和治疗组之间的平均体重没有明显差异（LY294002,10mg / kg，25mg / kg，50mg / kg和75）。 毫克/公斤）
LY294002的实验参考方法
激酶测定
PI828和LY294002的PI3K抑制在放射测定法中使用具有1μMATP的纯化的重组酶（IA类和IB类）测定。 激酶反应在室温（24℃）下进行1小时，并通过加入PBS终止。 随后使用S形剂量 - 响应曲线拟合（可变斜率）确定IC 50值。 通过激酶选择性筛选确定CK2和GSK3β（糖原合成酶激酶3β）抑制。 在10μMATP中对抗Upstate激酶组测试抑制剂（10μM; PI828和LY294002）。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析
将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z以5000个细胞/孔接种到96孔板中。 接种细胞后24小时，除去培养基并在溶解于DMSO或DMSO中的LY294002（0μM，10μM，25μM，50μM和75μM）存在下更换另外24小时和48小时。 H。 为了避免DMSO对细胞生长的任何非特异性毒性作用，在所有实验中DMSO浓度维持在0.5％。 向每个孔中加入MTT染料（5mg / mL）。 通过加入DMSO终止反应，并在多孔板读数器上在490nm处测量光密度。 减去不存在细胞时培养基的背景吸光度。 所有样品一式三份进行测定，并计算每个实验的平均值。 结果表示为对照的百分比，其被认为是100％。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
当它们是6-8周时使用无胸腺裸鼠。 将小鼠随机分成5个免费分成组（n = 4只小鼠）。 将小鼠置于相同的环境中，控制温度，湿度和12小时光照/黑暗循环。 将小鼠皮下接种CNE-2Z细胞（在200μLRPMI-1640中1×10 6个细胞/小鼠）到侧腹。 肿瘤摄取率为100％。 1周后，对不同剂量的LY294002（10mg / kg，25mg / kg，50mg / kg和75mg / kg，每周两次（n = 4只小鼠））的异种移植小鼠进行腹膜内注射，每组 监测处理过的小鼠的任何体征。每周测量两次体重和肿瘤大小。用卡尺测量肿瘤大小，计算肿瘤体积（体积=长轴×短轴2）。治疗结束时， 对所有小鼠实施安乐死。将一部分肿瘤组织固定在福尔马林中并包埋在石蜡中，另一部分在-70℃下保存。相关产品推荐：3-Methyladenine是 PI3K 的抑制剂
大鼠
通过腹膜内注射戊巴比妥钠（50mg / kg）麻醉重220-240g的雄性Sprague-Dawley大鼠。 将动物分成3组：NMDA +载体（DMSO）（n = 46），NMDA + LY294002（50nmol）（n = 25）和NMDA +渥曼青霉素（50nmol）（n = 23）。 将总体积为5μL的LY294002或与200nmol NMDA混合的渥曼青霉素注射到一只眼睛的玻璃体腔中。 将相同体积的DMSO注射到对侧眼的玻璃体腔中，其用作对照。 使用32号针在显微镜下进行注射，所述针连接到微量注射器。 将针插入角膜缘后约1mm处。 在注射后第2天和第7天评估视网膜中神经元和血管的损伤。 还研究了单独使用LY294002或Wortmannin的玻璃体内治疗对视网膜神经元和血管的影响。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
LY294002的生物活性
体外
LY294002（5μM）完全抑制HepG2细胞中PKB的磷酸化。 LY294002（5μM）也显示阻断胰岛素诱导的CHO-IR细胞中PKB Ser473的磷酸化。 LY294002也是CK2（酪蛋白激酶2）的有效抑制剂，IC50为98 nM。 LY294002还能够降低丝氨酸/苏氨酸激酶GSK3α和β的两种同种型的激酶活性。 当CNE-2Z细胞系在含有LY294002（0μM，10μM，25μM，50μM和75μM）的培养基中培养24小时和48小时时，细胞增殖以剂量依赖性方式显着降低 ]。
体内
与对照组相比，用LY294002（腹膜内注射，50mg / kg，75mg / kg）治疗显着降低了平均NPC肿瘤负荷。 用10mg / kg或25mg / kg LY294002治疗在降低肿瘤负荷方面不太有效。 用LY294002治疗的平均NPC肿瘤负荷以剂量依赖性方式显着降低，而对照组和治疗组之间的平均体重没有明显差异（LY294002,10mg / kg，25mg / kg，50mg / kg和75）。 毫克/公斤）
LY294002的实验参考方法
激酶测定
PI828和LY294002的PI3K抑制在放射测定法中使用具有1μMATP的纯化的重组酶（IA类和IB类）测定。 激酶反应在室温（24℃）下进行1小时，并通过加入PBS终止。 随后使用S形剂量 - 响应曲线拟合（可变斜率）确定IC 50值。 通过激酶选择性筛选确定CK2和GSK3β（糖原合成酶激酶3β）抑制。 在10μMATP中对抗Upstate激酶组测试抑制剂（10μM; PI828和LY294002）。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析
将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z以5000个细胞/孔接种到96孔板中。 接种细胞后24小时，除去培养基并在溶解于DMSO或DMSO中的LY294002（0μM，10μM，25μM，50μM和75μM）存在下更换另外24小时和48小时。 H。 为了避免DMSO对细胞生长的任何非特异性毒性作用，在所有实验中DMSO浓度维持在0.5％。 向每个孔中加入MTT染料（5mg / mL）。 通过加入DMSO终止反应，并在多孔板读数器上在490nm处测量光密度。 减去不存在细胞时培养基的背景吸光度。 所有样品一式三份进行测定，并计算每个实验的平均值。 结果表示为对照的百分比，其被认为是100％。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
当它们是6-8周时使用无胸腺裸鼠。 将小鼠随机分成5个免费分成组（n = 4只小鼠）。 将小鼠置于相同的环境中，控制温度，湿度和12小时光照/黑暗循环。 将小鼠皮下接种CNE-2Z细胞（在200μLRPMI-1640中1×10 6个细胞/小鼠）到侧腹。 肿瘤摄取率为100％。 1周后，对不同剂量的LY294002（10mg / kg，25mg / kg，50mg / kg和75mg / kg，每周两次（n = 4只小鼠））的异种移植小鼠进行腹膜内注射，每组 监测处理过的小鼠的任何体征。每周测量两次体重和肿瘤大小。用卡尺测量肿瘤大小，计算肿瘤体积（体积=长轴×短轴2）。治疗结束时， 对所有小鼠实施安乐死。将一部分肿瘤组织固定在福尔马林中并包埋在石蜡中，另一部分在-70℃下保存。相关产品推荐：3-Methyladenine是 PI3K 的抑制剂
大鼠
通过腹膜内注射戊巴比妥钠（50mg / kg）麻醉重220-240g的雄性Sprague-Dawley大鼠。 将动物分成3组：NMDA +载体（DMSO）（n = 46），NMDA + LY294002（50nmol）（n = 25）和NMDA +渥曼青霉素（50nmol）（n = 23）。 将总体积为5μL的LY294002或与200nmol NMDA混合的渥曼青霉素注射到一只眼睛的玻璃体腔中。 将相同体积的DMSO注射到对侧眼的玻璃体腔中，其用作对照。 使用32号针在显微镜下进行注射，所述针连接到微量注射器。 将针插入角膜缘后约1mm处。 在注射后第2天和第7天评估视网膜中神经元和血管的损伤。 还研究了单独使用LY294002或Wortmannin的玻璃体内治疗对视网膜神经元和血管的影响。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
