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Congo Red

    Congo Red 是一种偶氮染料。Congo Red 结合已被广泛用于组织切片中淀粉样蛋白的测定。
 
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    Congo Red的生物活性
 
    体外
 
    刚果红组织化学染色剂可作为一种简单的筛选工具,用于研究突变细胞中的聚集体是否具有错误折叠的β折叠薄片二级结构。刚果红组织化学染料具有与交叉的β折叠片状结构特异性结合的能力。野生型HSPB1应通过以非天然构象结合蛋白质来维持蛋白质稳态,从而防止底物聚集。然而,T139M突变体无法发挥这一功能,并导致错误折叠的蛋白质积聚,刚果红针对这些错误折叠的蛋白质进行插层,使其插入β折叠的片状结构之间。刚果红组织化学染色可作为研究突变细胞中聚集体是否具有错误折叠的β-折叠薄片二级结构的简单工具。
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    由于其细胞质体积较大,因此选择了HeLa细胞进行这些研究。用突变或野生型HSPB1构建体转染的细胞在盖玻片上生长24小时,然后用刚果红染色,以确定聚集体是否显示淀粉样变性。简而言之,首先将细胞用10%福尔马林固定10分钟,然后用1%刚果红染色5分钟,然后用0.01%氢氧化钾的50%乙醇溶液脱色。然后将盖玻片通过分级的乙醇浓缩液进行脱水,然后固定在固定介质中,并在若丹明滤镜下通过荧光显微镜检查。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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