SB 203580是一种p38 MAPK抑制剂

　　SB 203580是一种广泛使用的 p38 MAPK 抑制剂， IC50 介于 0.3-0.5μM 之间。 对 p38 MAPK 的选择性比 PKB, LCK, 和 GSK-3β 高100倍。

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

　　SB 203580的生物活性

　　IC50 & Target

　　体外

　　SB 203580抑制IL-2驱动的T细胞增殖，IC50为3-5μM，SB 203580能够以剂量依赖性方式抑制PDK1的活性，IC50在3-10μM范围内。 浓度为1μM的SB 203580足以抑制TF-1细胞中的p38激酶活性。 5和10μM的SB 203580增强NF-κB介导的基因转录，而与p65亚基的反式激活结构域上的磷酸化无关。 10μM的SB 203580增强了ERK1 / 2和JNK的磷酸化。

　　体内

　　所有动物用NS（未感染的对照）攻击并用SB203580或安慰剂治疗存活。 与安慰剂相比，在大肠杆菌前1小时用最高剂量的SB203580（100mg / kg）预处理增加了死亡的危害比。 对于大肠杆菌，与安慰剂相比，在48小时但不是24小时，低剂量和高剂量SB203580降低磷酸化的p38MAPK和磷酸化与总p38的比率。 高剂量SB203580在24小时时在组织学上降低肺中性粒细胞的趋势接近显着性（p = 0.09）并且在48小时时显着增加（p = 0.01），其模式随时间不同。 在几种细胞因子抑制和炎性疾病模型中评估SB 203580。 显然，它是小鼠和大鼠中炎性细胞因子产生的有效抑制剂，IC50值为15至25mg / kg 。

　　SB 203580的实验参考方法

　　细胞分析

　　通过蛋白质印迹分析p38，JNK1 / 2和ERK1 / 2的磷酸化。 简而言之，将TF-1细胞在含有0.1％FBS的RPMI 1640中培养16小时，随后用培养基或OA（30ng / mL）或SB 203580（1μM，5μM，10μM）加刺激不同时间段。 OA。 收获后，通过将细胞重悬于500μL1×样品缓冲液（含有2％SDS，10％甘油，2％β-巯基乙醇，60mM Tris-HCl（pH6.8）和溴酚蓝）中并裂解来制备总细胞提取物。 将细胞通过23G1针头（三次）。 将细胞提取物直接煮沸10分钟并储存在-20℃。 在上样之前，将样品再次煮沸5分钟，并通过在SDS / 12.5％PAGE凝胶（丙烯酰胺：双丙烯酰胺为173：1）上运行1/10体积来分离细胞提取物并转移至纤维素硝酸盐膜。 用抗体进行免疫印迹通过标准程序进行并进行检测。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

　　Animal Administration

　　小鼠

　　在存活研究中，将体重为20g至30g的C57BL / 6J小鼠用异氟烷短暂麻醉并用0.05mL IT生理盐水（NS，未感染的对照）或大肠杆菌（15×10 9 CFU / kg）攻击。 在NS攻击前1小时，小鼠（n = 24）接受腹膜内SB203580（100mg / kg，0.25mL）或仅稀释剂（安慰剂）。

　　受感染的动物在IT大肠杆菌（n = 241）之前1小时接受剂量为100,10,1或0.1mg / kg的SB203580或安慰剂; SB203580 100或0.1 mg / kg或安慰剂在大肠杆菌后1小时（n = 121）; 在大肠杆菌（n = 72）后12小时或SB203580 100mg / kg或安慰剂。 所有动物在攻击后4小时开始接受头孢曲松（100mg / kg，0.1mL，皮下）4天和NS（0.5mL，皮下）1天。 最初48小时每2小时观察动物，48小时至72小时每4小时观察一次动物，72小时至96小时每8小时观察动物，然后每天观察两次直至研究完成（168小时）。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。