SB-431542(ALK5 抑制剂)

　　SB-431542 是一种有效，选择性的 ALK5 抑制剂，IC50 值为 94 nM；同时也是转化生长因子 β 受体 (TGF-β Receptor) 抑制剂。

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

　　SB-431542生物活性

　　体外

　　SB-431542（1μM）显着降低TGF-β诱导的A498细胞中Smad蛋白的核积累。 SB-431542抑制TGF-β1诱导的胶原Iα1和PAI-1 mRNA，IC50值分别为60和50 nM。 此外，SB-431542抑制TGF-β1诱导的纤连蛋白mRNA和蛋白，IC50值分别为62和22 nM [1]。 SB-431542（10μM）是内源性激活素和TGF-β信号传导的选择性抑制剂，但对NIH 3T3细胞中的BMP信号传导没有影响[2]。 TRKI，SB-431542，抑制TGF-β诱导的转录，基因表达，细胞凋亡和生长抑制。 SB-431542减弱TGF-β的肿瘤促进作用，包括TGF-β诱导的EMT，细胞运动，迁移和侵袭以及人癌细胞系中血管内皮生长因子的分泌。 SB-431542诱导不受TGF-β生长抑制的细胞不依赖锚定的生长，而它可以减少由TGF-β促进生长的细胞的集落形成[3]。 SB-431542（0.3μM）抑制MG63细胞中TGF-β诱导的细胞增殖[4]。

　　体内

　　SB-431542（10mg / kg，i.p。）减少肺转移，但不显着改变原发性肿瘤4T1异种移植物的生长

　　SB-431542实验参考方法

　　激酶测定

　　将来自A549和HT29的每个库的总共100,000个细胞接种到12孔板的每个孔中。 将细胞在含有0.2％FBS的培养基中培养18小时，然后在SB-431542（10μM）存在下在0.5mL培养基中用5ng / mL TGF-β1处理24小时。 根据制造商的说明，将100μL每种上清液用于VEGF测定。 对于TGF-β1ELISA，将来自A549，VMRC-LCD和HT29的每个库的100,000个细胞接种到12孔板的每个孔中并血清饥饿20小时。 然后将细胞用SB-431542在0.5mL无血清RPMI培养基中处理24小时。 根据制造商的说明，将100μL每种上清液培养基激活并用于TGF-β1测定。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

　　细胞分析

　　将A498细胞以5,000至10,000个细胞/孔接种在96孔板中。 将细胞血清剥夺24小时，然后用SB-431542处理48小时以评估细胞毒性。 根据制造商的说明，通过用XTT标记和电子偶联试剂孵育细胞4小时来测定细胞活力。 具有活性线粒体的活细胞产生橙色产物甲,其使用平板读数器在A 450nm和A 500nm之间检测，参比波长大于600nm。 吸光度值与活细胞数相关。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

　　Animal Administration

　　将1万个4T1细胞皮下注射到6周龄Balb / c雌性小鼠的第二乳房脂肪垫中。 每周测量肿瘤两次，并使用以下公式计算体积：体积=宽度2×长度×0.52。 将小鼠随机分配到两个处理组：对照，n = 14（20％DMSO / 80％玉米油）; SB-431542处理，n = 15（在20％DMSO / 80％玉米油中10mg / kg体重，在肿瘤细胞接种后一天开始每周腹膜内注射三次。当第10天时的体积切除原发性肿瘤 注射4T1细胞后，每天监测所有小鼠，4周后实施安乐死，解剖转移至快速冷冻进行进一步分析。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。