您的位置:MCE > 抑制剂 >

Quizartinib

  Quizartinib (AC220) 是一种有效的 Flt3 酪氨酸激酶抑制剂,Kd值为1.6±0.7 nM。

  MCE 的所有产品仅用作科学研究,我们不为任何个人用途提供产品和服务

  体外

  Quizartinib(AC220)是一种新型化合物,明确优化为FLT3抑制剂,用于治疗急性髓性白血病(AML)。 Quizartinib抑制FLT3-WT和FLT3-ITD自身磷酸化,IC5分别为4.2±0.3 nM和1.1±0.1 nM。 Quizartinib抑制MV4-11和A375细胞,IC50分别为0.56±0.3 nM和> 10000 nM。 Quizartinib在细胞试验中以低纳摩尔效力抑制FLT3,并且在筛选大多数人蛋白激酶组时具有高选择性。

  体内

  Quizartinib(AC220)在体内抑制FLT3活性,每天口服一次,以低至1 mg / kg的剂量显着延长FLT3-ITD AML小鼠模型的存活率,在FLT3依赖的小鼠异种移植模型中消除肿瘤10 mg / kg,并有效抑制原发性患者细胞中的FLT3活性。通过比较3mg / kg的口服和静脉内药代动力学在大鼠中测定的Quizartinib的口服生物利用度为约40%。通过口服强饲法施用单次10mg / kg剂量的Quizartinib,并且在给药后2个时间点处死小鼠,每组使用4只动物。 肿瘤样品中总FLT3和磷酸-FLT3的定量揭示了FLT3自身磷酸化的时间依赖性抑制。 FLT3活性在2小时时抑制90%,在给药后24小时抑制40%。 因此,基于药代动力学实验,抑制程度与预期的游离Quizartinib血浆水平良好相关

  实验参考方法

  激酶测定

  进行KinomeScan激酶结合测定。 对于FLT3测定,使用仅跨越催化结构域的激酶构建体(氨基酸592至969)。 该构建体不包括近膜结构域,旨在测量开放FLT3活性位点对抑制剂的内在结合亲和力。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

  Quizartinib的细胞分析

  MV4-11和RS4; 11细胞分别在含有10%胎牛血清(FBS)的Iscove培养基和10%FBS的RPMI培养基中培养。 对于增殖测定,将细胞在低血清培养基(0.5%FBS)中培养过夜,然后以每孔40000个细胞接种于96孔板中。 将抑制剂(例如,Quizartinib)加入细胞中并在37℃下孵育72小时。 使用Cell Titer-Blue Cell Viability Assay测量细胞活力。 为了测量对FLT3自磷酸化的抑制,将细胞在低血清培养基(0.5%FBS)中培养过夜,并在第二天以9600孔板中的每孔400000个细胞的密度接种。 将细胞与抑制剂(例如Quizartinib)在37℃下孵育2小时。 为了在RS4; 11细胞中诱导FLT3自磷酸化,在2小时化合物孵育后加入100ng / mL FLT3配体15分钟。 制备细胞裂解物并在预涂有总FLT3捕获抗体的96孔板中温育。 将包被的平板与针对FLT3的生物素化抗体一起温育以检测总FLT3或针对磷酸酪氨酸的抗体以检测FLT3自身磷酸化。 在两种情况下,SULFO标记的链霉抗生物素蛋白二抗用于Meso Scale Discovery平台上的电化学发光检测。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

  Animal Administration

  小鼠

  使用雌性NU / NU或严重联合免疫缺陷小鼠。 Quizartinib(盐酸盐)配制成22%羟丙基-β-环糊精,CEP-701配制成20%gelucire 44/14水溶液(体积/体积),MLN-518和舒尼替尼配制成10 mM柠檬酸钠(pH值) 3.5),PKC-412以3:1 gelucire 44 / 14-丙二醇(体积/体积)配制,索拉非尼(甲苯磺酸盐)配制在80%PEG-400中。 选择化合物浓度以递送10mL / kg体积的所需剂量。 通过口服强饲法给予化合物,并在给药后0.25,0.5,1,2,4,6和24小时收集血浆样品。 为了收集血浆样品,使用3组每组3只动物进行半视觉上的眼部出血(150μL),每只动物服用2至3个时间点以获得总共3个独立的血浆浓度时间过程。 用含有内标的4体积乙腈提取血浆样品和对照(25μL),并通过液相色谱串联质谱分析。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

点击查看原文:Quizartinib


推荐类似文章

抑制剂