Vorinostat

　　Vorinostat 是一种有效的，可口服的 HDAC1，HDAC2，HDAC3 (Class I)，HDAC7 (Class II) 和 Class IV (HDAC11) 的抑制剂，对 HDAC1/3 的 ID50 值分别为 10 nM 和 20 nM。

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　　vorinostat生物活性

　　体外

　　伏立诺他在处理24小时后已经以低剂量（3μM）有效抑制MES-SA细胞生长。 HDAC I类（HDAC2和3）以及II类（HDAC7）优先受这种治疗的影响。 伏立诺他显着增加MES-SA细胞中p21WAF1的表达和凋亡。 Vorinostat抑制SK-N-SH和SK-N-Be（2）C，IC25值分别为1μM和0.5μM。

　　体内

　　注射5×106 MES-SA细胞的裸鼠Vorinostat（50 mg / kg /天）可使肿瘤生长减少50％以上

　　vorinostat实验参考方法

　　细胞分析

　　通过使用RIPA缓冲液（25mM Tris-HCl pH 7.6,150mM NaCl，1％NP-40,1％脱氧胆酸钠，0.1％SDS）制备细胞裂解物，并通过Bio-Rad DC蛋白质测定法测定蛋白质浓度。 通过SDS-PAGE分离蛋白质裂解物并转移至硝酸纤维素膜。 使用以下抗体和稀释液：兔抗HDAC1（1μg/ mL）; 兔抗HDAC2（1μg/ mL）; 兔抗HDAC3（9μg/ mL）; 兔抗HDAC7（3μg/ mL）; 小鼠抗p21WAF1（0.5μg/ mL）。 作为二抗，兔抗小鼠和猪抗兔HRP偶联抗体的终浓度为1μg/ mL。 在4℃下过夜温育用于所有一抗，然后洗涤并在室温下用二抗孵育2小时。 通过增强的化学发光测定使特异性蛋白质条带可视化。 为了证明蛋白质样品的等量加载，所有蛋白质印迹都被探测β-微管蛋白。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

　　Animal Administration

　　用异氟醚麻醉12周龄雄性小鼠（n = 14），并将5×106个MES-SA细胞皮下注射到动物的右侧腹中。 来自对照组的小鼠接受含有300μL空HOP-β-CD（2-羟丙基-β-环糊精）囊泡的安慰剂。 另一组小鼠接受溶解于HOP-β-CD中的伏立诺他，浓度为50mg / kg /天。 从注射MES-SA肿瘤细胞后第4天开始腹膜内施用空囊泡和伏立诺他。 每周两次估计小鼠体重和肿瘤大小（w2×l×0.52;通过卡尺测量）。 将所有小鼠治疗21天，然后通过颈椎脱位处死。 将每个肿瘤作为整体分离，并确定不同的肿瘤参数。 最后，将肿瘤切片冷冻保存并将福尔马林固定（4％）用于进一步分析。

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。