PD173074是一种FGFR抑制剂

　　PD173074 是有效的 FGFR1 抑制剂，IC50 为 25 nM；也可抑制 VEGFR2 的活性，IC50 值为 100-200 nM，对 FGFR1 的活性是 PDGFR 和 c-Src 的1000多倍。

 

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　　生物活性

 

　　PD173074的体外活性

 

　　PD 173074与IC呈剂量依赖性抑制FGFR1的自磷酸化50在1-5 nM范围内。PD 173074是FGFR1的ATP竞争性抑制剂，具有抑制常数（K一世）的40 nM。PD 173074和SU 5402用IC产生浓度依赖性的降低FGF-2增强颗粒神经元存活的效果50分别为8 nM和9μM。PD 173074不抑制小脑颗粒神经元中FGF-2信号分子的神经营养作用和神经中枢作用。PD 173074和SU 5402浓度依赖性地抑制了神经突生长反应，当用FGF-2处理的在多赖氨酸/层粘连蛋白上生长的颗粒神经元进行IC检测时50分别为22 nM和25μM。PD173074有效拮抗FGF-2对培养物中OL祖细胞增殖和分化的影响。丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）激活是FGFR或PDGFR激活后的下游事件，在受FGF-2刺激但未受PDGF刺激的OL祖细胞中，PD173074也阻止了丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）激活

 

　　体内活性

 

　　PD 173074（1 mg / kg，ip）对小鼠的FGF诱导的新血管形成和血管生成具有剂量依赖性抑制作用。D173074（25 mg / kg，po）显着抑制小鼠肿瘤生长。

 

　　PD173074的实验参考方法

 

　　细胞测定

 

　　先前已经描述了过表达VEGFR2（Flk-1）的NIH 3T3细胞系。该细胞系还内源表达FGFR1。单元格（1×106）在补充有10％小牛血清的DMEM中接种10 cm2培养皿，使其生长48小时。然后除去培养基，并使细胞在饥饿培养基（具有0.1％小牛血清的DMEM）中静止。18小时后，将细胞与在饥饿培养基中制备的各种浓度的PD 173074一起温育5分钟。然后在37°C用生长因子[VEGF（100 ng / mL）或aFGF（100 ng / mL）和肝素（10μg/ mL）]刺激细胞5分钟。将细胞用冰冷的PBS洗涤并在1 mL裂解缓冲液（25 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl，1％Triton X-100、10％甘油，1 mM EGTA，1.5 mM MgCl2，含磷酸酶抑制剂（0.2 mM Na，1 mM PMSF，10μg/ mL抑肽酶，10μg/ mL亮肽素）3VO4）。对于FGFR1的抑制研究，用FGFR1抗体对细胞裂解液进行免疫沉淀，然后通过SDS-PAGE分析并用磷酸酪氨酸抗体免疫印迹。对于VEGFR2的抑制研究，直接通过SDS-PAGE分析细胞裂解液（20 ?L），并用磷酸酪氨酸抗体进行免疫印迹。

 

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

　　动物实验方法

 

　　六周大的无胸腺裸鼠皮下接种3×105 NIH 3T3细胞表达Y373C FGFR3和Ras V12。在肿瘤注射当天开始腹膜内注射20 mg / kg PD173074或0.05 mol /乳酸缓冲液，并持续9天。每个实验包括十只小鼠。

 

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。