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Ac-DEVD-CHO

    Ac-DEVD-CHO 是一种特异性 Caspase-3 抑制剂,Ki 值为 230 pM。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    为了确定胱天蛋白酶-3在SLNT诱导的细胞凋亡中的作用,使用半胱天冬酶-3抑制剂(Ac-DEVD-CHO)。添加Ac-DEVD-CHO可显着预防SLNT诱导的细胞凋亡(从32.91±1.21%降至15.88±1.58%,而NC和Ac-DEVD-CHO组分别为6.45±0.96%,7.77±0.79%)[2] ]。经金丝桃素介导的PDT处理后,经zVAD-fmk(5.32%)或Ac-DEVD-CHO(7.43%)预处理的细胞凋亡率明显下降[3]。值得注意的是,10μmol/ L Ac-DEVD-CHO部分阻断了SIN诱导的细胞凋亡的作用并减少了凋亡细胞核的数量。SIN的这些作用被胱天蛋白酶-3抑制剂Ac-DEVD-CHO阻断。喜树碱(4μM)是一种阳性对照,可增加caspase-3活性,这也被Ac-DEVD-CHO阻断。
 
    在体内
 
    与模型组比较,CI组血清BUN浓度在术后各时间点均明显下降,6小时后Cr明显下降,12小时和24小时后恢复至假手术组; 在所有时间点,血清TNF-α,IL-6浓度均降低,IL-10浓度显着升高。[TNF-α(μg/ L)6小时:436.2±64.2对比653.6±8.9,12小时:233.4±85.4对比579.7±137.1,24小时:151.0±90.3对比551.0±119.8,IL-6(μg) / L)6小时:1033.2±345.8对比1 595.3±159.4,12小时:366.3±68.3对比1 330.7±249.8,24小时:241.2±208.4对比815.3±572.7,IL-10(μg/ L)6小时:33.6±10.4对比26.6±4.5,12小时:37.2±5.0对比24.5±4.3,24小时:38.3±5.5对比18.2±1.6,均P <0.05]; 肾细胞凋亡率在所有时间点均显着下降:.
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    将OCL与RANKL一起温育,并用含有或不含特异性半胱天冬酶-3抑制剂Ac-DEVD-CHO(10μM)的0.5mM SIN处理24小时。在处理结束时,用PBS洗涤细胞,并用10μMHoechst33258染料染色15分钟。用荧光显微镜捕获staineing细胞的图像。通过计数每个孔中具有凋亡核浓缩的细胞数来评估差异。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    动物管理局
 
    对102只雄性小鼠进行盲肠结扎和穿刺或假手术。根据随机数表将动物分成三个相等的组(n = 34):假手术组,模型组和半胱天冬酶-3抑制剂(CI)组。在CLP前30分钟,在CI组中皮下注射Ac-DEVD-CHO(4μg/ g)。测定血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,用酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL-6和IL-10)的浓度( ELISA),通过流式细胞术测定肾细胞凋亡率。观察三组小鼠的4天和7天存活率。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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