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动物小鼠实验的注意事项

  Hello,大家好,我叫小白 ,是一只平平无奇的实验室小白鼠,我有好多兄弟姐妹,小黑 (黑鼠)、小灰 (褐鼠)、小肉 (裸鼠),还有几位有着洋气外文名的族人,NOG、NCG/NOG/NSG,看了下面这个图,相信一定分得清了。后面三位是重点保护对象,不仅心灵脆弱,身体也很脆弱,管它努不努力,生命周期全靠天意。
 
  
 
  卓越的天资让我们家族成为少数模式生物之一 (OS: 请把“优秀”打在公屏上!),本小白终归是承受了这个年纪不该承受的生命之重。今日我们现身吐槽大会,就是要澄清一些误会 (严肃脸),列了几宗罪状,特地请了小象萌 Cece  作为见证者,希望主人们引以为戒。
 
  ■ 第一宗罪:给药体积不是你想给多少就给多少
 
   小白: 以腹腔给药为例,建议的最佳体积在 5 mL-10 mL/kg,算下来 100-200  μL 左右 (PS: 敢情您打 1 mL 是为了少喂点水么?),很多时候,这些液体里还有很大比例的 DMSO 等毒性溶剂,是药三分毒,况且它还只是个和 (huo) 药的,给多了就叫啥?得之要我命,失之我高兴。
 
   萌 Cece 建议:小鼠单次腹腔给药最佳体积 5 mL-10 mL/kg,在溶解度允许情况下适当减少给药体积,用 DMSO 配制的母液时,对于正常小鼠或大鼠,建议 DMSO 的终浓度不要大于 10%;对于裸鼠或体弱小鼠或大鼠,建议 DMSO 的终浓度尽量不要超过 2%;对于正常小鼠,如果给药频率超过一天三次,建议 DMSO 的终浓度尽量不要超过 5%。也建议把动物的周龄/月龄考虑在内,酌情调整。
 
  ■ 第二宗罪:有明显肉眼可见的颗粒进行腹腔给药
 
  小白: 主人对小伙伴的身体进行了“深入”地探索后发现,肠道附近有多处“蛋花”样的沉积物,或固体颗粒。
 
   萌 Cece 建议:优先建议选择能溶解澄清的方案,当然确实有一些产品不溶于水,但还是会用生理盐水/PBS 溶解成混悬状态或沉淀给药的报道,这种情况要慎重,一方面可借助研钵或超声的方式将固体粉末研磨/超声成尽可能的小颗粒,给药体积也要尽可能小,调整合理的给药频次和剂量,强烈建议做预实验。
 
  ■ 第三宗罪:连续多天用同一管稀释液给药
 
  小白: 曾有主,欲以苞谷油腹腔一兄,置多日,中有不明物。予之,遂死……
 
  萌 Cece:请说鼠话。
 
  小白: 曾经有位主人,用玉米油给我的小伙伴进行腹腔给药,我眼见那管玉米油溶好的药物都搁好多天了,似乎还有些细小的不明物,小伙伴没扛过一周就去了。主人说小伙伴是因为感染死的,还说文献里都是骗人的。
 
  萌 Cece 建议:玉米油、橄榄油、花生油和矿物油比较容易受污染,有研究论证,长期腹腔给药会导致动物腹膜炎症,其中花生油和矿物油引起较严重的腹膜炎症,玉米油和橄榄油较轻 (减少巨噬细胞),一方面,建议分装密封保存,新鲜配置,另一方面优先采用灌胃的给药方式,如需腹腔注射,参照我们官网的建议,周期、给药频次、单次给药体积都需谨慎设置。详情可参考 MCE 官网的信息。
 
  ■ 第四宗罪:每天给药多次,有机溶剂总比例高
 
  小白: 腹腔给药用 5% DMSO 配置,就打 100 μL,咋就快瘫痪了呢,主人很困惑。本小白也很困惑 (瘫痪都忍不住爬起来叉腰吐槽),主人,您一天打 6 次咋不说?气鼓鼓,变大鼠,现在请叫我大白谢谢。
 
  萌 Cece 建议:我们以雨蛙素 (Ceruletide) 这个产品为例吧。雨蛙素用于急性胰腺癌模型是需要隔一小时给一次药,一天给药 5-7 次,如果用 DMSO 配置,需要将 DMSO 终浓度降到很低很低,重要的是,雨蛙素本身水溶性非常好,这种情况首先建议用生理盐水/PBS 现配给药的。友情提醒,遇到雨蛙素这种产品,以及联合用药的情况,要按照比例和频次及时、灵活调整给药溶剂。
 
  ■ 第五宗罪:用药剂量太高
 
  小白: 主人用高出肿瘤模型用药的剂量直接用于关节炎模型,小伙伴发生伤残,也有的没顶住撒手鼠寰,唉,终究是太难。
 
  萌 Cece 建议:优先参考文献中同类动物模型的剂量信息,如没有,建议多做几组剂量做比较。
 
  ■ 第六宗罪:过于粗暴,没有考虑“鼠的尊严”
 
  小白: 肌注打穿腿,灌胃戳破食管,腹腔戳进内脏,本小白都想大声说,放开那只鼠,让我来!害,咱说点能改善的,天冷时给药前加热一下吧,咱都看到实验室的水浴锅了,本小白也想要被温柔对待
 
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