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Cytochalasin B-细胞松弛素B

  Cytochalasin B 是一种能透过细胞的真菌毒素,能够与肌动蛋白丝的有刺端结合,扰乱肌动蛋白聚合物的形成,对 F-actin 的 Kd 值为 1.4-2.2 nM。
 
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  生物活性
 
  体外
 
  细胞松弛素B是一种与肌动蛋白丝的带刺末端结合的细胞渗透性霉菌毒素,可抑制肌动蛋白丝的伸长和缩短dMgCl存在下F-肌动蛋白的2.2纳秒和1.4纳秒2 (2毫米)或氯化镁2 (2 mM)加上KCl。细胞松弛素B(0.1-10μM)对IC有抑制作用,可抑制多种鼠癌细胞502.56μM(M109c),10.46μM(B16BL6),105.5μM(P388 / ADR),51.9μM(P388 / S)和IC80使用IC治疗3 h后,分别为12.23μM(M109c),44.86μM(B16BL6),188.4μM(P388 / ADR),84.1μM(P388 / S)50s为0.25μM(M109c),0.37μM(B16F10),0.87μM(B16BL6)和IC80治疗4天后的s分别为0.75μM(M109c),1.21μM(B16F10),10.41μM(B16BL6)。细胞松弛素B(6μM)增加了肌原纤维片段化指数(MFI),这归因于肌原纤维蛋白强烈分裂成短片段。细胞松弛素B也加速肌动蛋白丝的破坏。此外,细胞松弛素B加速了从F-肌动蛋白向G-肌动蛋白的转化,降低了F-肌动蛋白的含量,并在死后调节过程中显着增加了G-肌动蛋白条带
 
  体内
 
  细胞松弛素B(10、25、50 mg / kg,ip)剂量依赖性地增加患有P388 / ADR白血病的Balb / c小鼠的预期寿命。50 mg / kg的细胞松弛素B在具有多重耐药性的P388 / ADR队列中产生10%的长期存活率,在对药物敏感的P388 / S队列中产生40%的长期存活率
 
  实验参考方法
 
  细胞测定
 
  附着的细胞系M109c,B16BL6和B16F10接种到1-4×104在用细胞松弛素B处理前1天,在24孔培养板中以2 mL的体积添加细胞/ mL。P388 / ADR细胞的悬浮培养以5×10接种4细胞/ mL,并使其在细胞松弛素B处理前生长过夜。细胞用细胞松弛素B为3个小时,以及2,3,或4天。在连续暴露2天,3天或4天的情况下,将附着的细胞用胰蛋白酶消化并用血球计数器计数。白血病细胞悬液用库尔特计数器计数。在短期接触的情况下,将细胞用新鲜培养基洗涤两次,然后用胰蛋白酶消化(P388 / ADR细胞除外),重新接种,并使其再生长3天,然后对其进行计数。与未处理的对照细胞相比,将生长结果计算为高于接种密度的细胞数量,并以图形方式表示为对照增加的百分比
 
  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
  动物实验方法
 
  老鼠
 
  为了进行化学疗法测试,异氟醚麻醉下的Balb / c小鼠接受2×10攻击5锥虫蓝阴性P388 / S或P388 / ADR皮下皮下(sc)的体积为200μL。保持未经治疗的小鼠,以便在没有化学干预的情况下确定攻击的致死性。长期存活定义为在观察期持续时间内存活的受攻击小鼠。细胞松弛素B和D以2%羧甲基纤维素1%吐温20(CMC / Tw)的悬浮液形式制备,用于腹膜内(ip)给药。在最初攻击后的第1至8天,将同系物或媒介物施用于白血病攻击的小鼠
 
  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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