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盐酸阿霉素

    Doxorubicin hydrochloride是一种有细胞毒性的蒽环类抗生素,用于治疗多种癌症。Doxorubicin 在癌细胞中起作用的可能机制是嵌入 DNA 和破坏 topoisomerase-II 介导的DNA修复。Doxorubicin hydrochloride 下调 AMPK 的基础磷酸化以及下游 acetyl-CoA 羧化酶。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    在最高测试浓度(分别为2μM和10μM)下混合阿霉素和辛伐他汀会杀死97%的Hela细胞。
 
    体内
 
    给携带PC3异种移植物的小鼠注射2、4或8 mg / kg阿霉素,并随时间测量肿瘤体积。2 mg / kg的剂量不会影响肿瘤的生长,而较高的剂量最初会延迟肿瘤的生长(第18和22天时p <0.05),阿霉素4 mg / kg或8 mg / kg会显着降低PC3异种移植物中c-FLIP的水平[3]。在大鼠中单次腹膜内注射10 mg / kg(阿霉素1),每天腹膜内注射1 mg / kg(阿霉素2)10次,或每周5次腹膜内注射2 mg / kg(阿霉素3)。在第28天,阿霉素1的死亡率达到80%,而在第107天和第98天,阿霉素2和阿霉素3的死亡率分别达到80%。阿霉素DOX1在第2周时的分数缩短降低了30%,阿霉素2在第13周时的分数缩短了55%,而阿霉素3在第13周时的分数缩短了
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    将160μLHela细胞悬液(3×10 4细胞/ mL)分配到三个96孔U型底微孔板中,并在5%CO 2的完全湿润的气氛中于37°C孵育24 h。在板1中,将阿霉素(20μL;终浓度,0.1-2μM)和辛伐他汀(20μL;终浓度,0.25-2μM)的系列稀释液添加到200μL终体积中,再孵育72小时。在板2和3中,添加每种药物(辛伐他汀或阿霉素,40μL)的系列稀释液。孵育24小时后,吸出培养基,并在PBS中洗涤细胞。然后,添加其他药物的连续稀释液(40μL),并添加培养基至最终体积为200μL,并孵育48小时。阿霉素和辛伐他汀分别用作阳性对照(每孔40μL),仅用溶剂处理的细胞被视为阴性对照。为了评估细胞存活率,将20μLMTT溶液(PBS中5 mg / mL)添加到每个孔中并孵育3小时。然后,将介质替换为150μLDMSO,并通过反复吸移溶液来完全溶解甲maz晶体。然后通过ELISA酶标仪在540nm处测定吸光度。在4或8个孔中测定每种药物的浓度,并重复3次。阿霉素的细胞毒性/细胞抑制作用表示为相对生存力(%对照)并计算。阴性对照中细胞存活的百分比假定为100。相对活力=(实验吸光度-背景吸光度)/(未处理对照的吸光度-背景吸光度)×100%阿霉素的细胞毒性/细胞抑制作用表示为相对生存力(%对照)并计算。阴性对照中细胞存活的百分比假定为100。相对活力=(实验吸光度-背景吸光度)/(未处理对照的吸光度-背景吸光度)×100%阿霉素的细胞毒性/细胞抑制作用表示为相对生存力(%对照)并计算。阴性对照中细胞存活的百分比假定为100。相对活力=(实验吸光度-背景吸光度)/(未处理对照的吸光度-背景吸光度)×100%.
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    动物管理局
 
    小鼠
 
    使用无胸腺雄性裸鼠(3-4周龄)。将PC3细胞(4×10 6)皮下注射到小鼠的腹侧。将带有肿瘤的动物随机分配至治疗组(每组五或六只小鼠),并在异种移植物达到约100 mm 3的体积时开始治疗。使用数字卡尺测量肿瘤,并使用以下公式计算体积:Volume = Width 2×长度×0.52,其中宽度表示肿瘤的较短尺寸。根据需要使用媒介物(含有0.1%BSA的PBS),阿霉素(2-8 mg / kg),Apo2L / TRAIL(500μg/动物)或4 mg / kg阿霉素与500μgApo2L /落后。阿霉素是全身性给药,而Apo2L / TRAIL是肿瘤内或全身性给药。所有治疗均给予一次。每天监测小鼠的不良反应(无精打采和app的外观)的迹象。治疗似乎耐受良好。计算每个数据点的平均值±SEM。通过学生t检验分析治疗组之间的差异。当P <0.05时,差异被认为是显着的。
 
    大鼠
 
    将30只体重250至300 g的雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3个实验组中的1组:阿霉素时间表1(阿霉素1,n = 10),阿霉素时间表2(阿霉素2,n = 10)或阿霉素时间表3(阿霉素3,n = 10)。对于所有阿霉素治疗方案,阿霉素的累积剂量为10 mg / kg。附表1涉及腹膜内单次推注阿霉素,剂量为10 mg / kg。附表2涉及连续10天以1 mg / kg腹腔注射阿霉素10次。附表3涉及每周2次,每次2 mg / kg,腹膜内注射5次阿霉素。刚好在第一次阿霉素治疗之前和开始进行阿霉素治疗后的每周间隔中,
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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