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Salinomycin-Procoxacin

    Salinomycin是具有强大的抗菌 (anti-bacterial) 活性的抗球虫药,和靶向人类癌症干细胞的新型抗癌剂。
 
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    Salinomycin的生物活性
 
    体外
 
    沙利霉素是Wnt信号级联的有效抑制剂。用盐霉素孵育恶性淋巴细胞在48小时内诱导细胞凋亡,平均IC 50为230nM。沙利霉素也是一种抗生素钾离子载体,最近有报道称其作为选择性乳腺癌干细胞抑制剂。沙利霉素是一种新型有效的抗癌药物,可通过IC 50抑制SW620细胞和Cisp抗性SW620细胞分别为1.54±0.23μM和0.32±0.05μM。发现沙利霉素具有杀死癌症干细胞(CSC)和治疗抗性癌细胞的能力。在连续用盐霉素处理48小时后,在显微镜下观察凋亡细胞,并在一个视野中随机计数至少100个细胞。在Hispchst33342染色的凋亡细胞的数量在Cisp抗性SW620细胞(20.20±3.72)中显着高于SW620细胞(9.40±2.07)/ 100个细胞(p <0.05)。用盐霉素处理48小时后,流式细胞术分析用于检测SW620细胞和Cisp抗性SW620细胞中的细胞凋亡。Cisp抗性SW620细胞的细胞凋亡率(37.82±3.63%)显着高于SW620细胞(16.78±2.56%)(p <0.05)。
 
    体内
 
    在施用4mg / kg沙利霉素(Sal),8mg / kg沙利霉素和10uL / g盐水6周后,处死小鼠。与对照组相比,沙利霉素治疗组的肝肿瘤大小减少。肿瘤的平均直径从12.17 mm减少到3.67 mm(p <0.05),肿瘤的平均体积(V =长度×宽度2 ×0.5)从819 mm 3减少到25.25 mm 3(P <0.05)。接下来,收获肿瘤,然后进行HE染色,免疫组织化学和TUNEL测定,以评估沙利霉素的抗肿瘤活性。HE染色显示肝癌组织结构:不同大小的细胞核,肝细胞结构被破坏。免疫组织化学显示沙利霉素处理后PCNA表达较低。HE染色和TUNEL测定表明,沙利霉素处理组的凋亡率高于对照组。此外,免疫组织化学显示在沙利霉素处理后Bax / Bcl-2比率增加。与对照组相比,沙利霉素处理组中β-连环蛋白的蛋白表达降低。沙利霉素是一种单羧酸聚醚型抗生素,通过发酵生产白色链霉菌具有特定的环状结构,可与病原微生物和球虫的细胞外阳离子,特别是K +,Na +,Rb +形成复合物,以改变细胞内和细胞外的离子浓度
 
    Salinomycin的实验参考方法
 
    细胞分析
 
    对于SW620细胞或Cisp抗性SW620细胞中的顺铂或沙利霉素IC 50分析,将细胞(1×10 4 /孔)在96孔板中培养,并用不同浓度的不同化学治疗剂(顺铂,沙利霉素)处理48小时。然后将20μL细胞计数试剂盒-8(CCK-8)加入96孔中的每一个中。在37℃温育4小时后,使用扫描读数器在450nm处检测光密度(OD)值。细胞生长抑制率被描述为细胞抑制曲线,并且Xlfit 5.2软件评估IC 50参数(抑制50%细胞的浓度)。用于细胞增殖分析,SW620细胞或Cisp抗性SW620细胞(5×10 3/孔)也接种于含有血清的培养基的96孔板中,并用顺铂(5μM,根据计算的SW620细胞中顺铂的IC 50值)处理0,12,24,48,72和96小时。然后将20μL细胞计数试剂盒-8加入96孔中的每一个中。在37℃温育4小时后,着色反应也在450nm处定量。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    Animal Administration
 
    小鼠
 
    裸鼠(nu / nu; 4-6周龄)。将HepG2细胞悬浮于100mL 1:1无血清DMEM和Matrigel中。用氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉小鼠,在手术打开腹部后,将HepG2细胞接种到肝实质中,每3天监测小鼠35天。最后,将18只裸鼠分成三组,每天腹膜内注射6周:两个沙利霉素处理组(4mg / kg沙利霉素组,8mg / kg沙利霉素组)和对照组(盐水组)。
 
    大鼠
 
    在实验中使用总共10只雄性大鼠。常规麻醉后,打开腹部。在重新悬浮不含血清DMEM和基质胶的高葡萄糖培养基后,将膀胱移行癌细胞系T24接种于大鼠膀胱实质中,然后缝合腹部。术后,将大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。术后实验组大鼠腹腔注射盐度霉素,剂量为8 mg / kg,对照组大鼠腹腔注射生理盐水。在药物管理期间进行密切观察。15天后,通过颈椎脱位处死大鼠,
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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