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ADU-S100铵盐

    ADU-S100 ammonium salt (ML RR-S2 CDA ammonium salt; MIW815 ammonium salt) 是干扰素基因刺激物的激活剂 (STING),具有有效的抗肿瘤和免疫活性。
 
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    生物活性
 
    体外
 
    ADU-S100在THP-1人单核细胞中显示出超过CDA的I型IFN产生。相反,二硫键,混合连接的环状二核苷酸(CDN)衍生物(ML RR-CDA,ML RR-S2 CDG和ML RR-S2 cGAMP)有效激活所有五个hSTING等位基因,包括难治性hSTING REF和hSTING Q等位基因。 。与内源性ML cGAMP和TLR3激动剂聚I:C相比,以摩尔当量计,ADU-S100诱导IFN-β和促炎性细胞因子TNF-α,IL-6和MCP-1的最高表达。还发现ADU-S100在小鼠骨髓巨噬细胞(BMM)中诱导STING聚集并诱导TBK1和IRF3磷酸化。与ML cGAMP相比,ADU-S100可诱导更高水平的IFN-α 。
 
    体内
 
    与内源性ML cGAMP相比,ADU-S100具有更高的抗肿瘤控制能力。在B16荷瘤小鼠中进行ADU-S100化合物的剂量反应,确定最佳抗肿瘤剂量水平,该剂量水平还引起最大的肿瘤抗原特异性CD8 + T细胞反应,并将长期存活率提高至50%
 
    实验参考方法
 
    细胞分析
 
    将冷冻保存的hPBMC解冻,将每孔1×10 6个细胞置于96孔板中的RPMI培养基中,该培养基中添加了10%FBS,1%非必需氨基酸,1%青霉素/链霉素,L-谷氨酰胺,10 mM HEPES缓冲液,1 mM丙酮酸钠,0.055 mMβ-ME在37°C和5%CO 2的条件下。用10μMADU-S100或ML cGAMP刺激细胞6小时,并收集上清液。将上清液按1:2稀释,并使用Cytometric Bead Array(CBA)Human Flex Set检测IFN-α蛋白。使用FACSVerse细胞计数仪收集数据并通过FCAP Array Software分析。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
 
    动物管理局
 
    小鼠
 
    WT C57BL / 6小鼠的左胁腹接种了5×10 4 B16.F10细胞(n = 8)。当肿瘤体积为100 mm时,3只小鼠接受3种IT剂量的ML RR-S2 CDG(25μg),ADU-S100(50μg)或HBSS作为对照。WT C57BL / 6小鼠的左胁腹接种了5×10 4 B16.F10细胞(n = 5)。当肿瘤体积为100 mm 3时,他们以5、25、50或100μg或HBSS的剂量接受了3IT剂量的ADU-S100或HBSS作为对照。WT C57BL / 6小鼠的左侧腹接种了5×10 4 B16.F10细胞(n = 8)。当肿瘤体积为100 mm 3时他们接受三剂100μgADU-S100或HBSS的IT剂量作为对照。在第13、17和20天进行治疗,每周两次进行肿瘤测量。结果通过对数秩(Mantel-Cox)测试(A和C)显示为存活百分比。
 
    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

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